? ? ? ? ?PCR實驗室建設(shè)需要注意一些什么問題點呢？如何才能讓更全面的了解PCR實驗室需要的一些問題點呢，深圳賽諾依照自己對行業(yè)從業(yè)16年的經(jīng)驗，給我們列出了4點關(guān)于PCR實驗室建設(shè)的一些要點，讓我們在建實驗室的時候心里有底、不被別人忽悠：

? ? ? ? ?第一：樣品準(zhǔn)備區(qū)。??

? ? ? ? ?該區(qū)域無壓力設(shè)置要求。該區(qū)域用于分樣，研磨、粉碎、均勻漿料。這些粉碎、研磨和均漿處理過程中可能會產(chǎn)生氣溶膠，因此陽性樣品可能會污染后續(xù)操作。該區(qū)與后區(qū)嚴(yán)格隔離，應(yīng)放置在與后三區(qū)隔離的獨立房間內(nèi)。在樣品準(zhǔn)備區(qū)域內(nèi)也可以設(shè)置專用的封閉區(qū)域和房間來接收和儲藏樣品。這個房間可以放冰箱儲藏樣品，應(yīng)該和樣品準(zhǔn)備區(qū)的其他區(qū)域隔離。樣品備用區(qū)的人員不得進入試劑備用區(qū)。

? ? ? ? ?第二：擴大和產(chǎn)品檢測區(qū)域。??

? ? ? ? ?該區(qū)域用于擴大PCR和分析PCR。PER儀放在這個區(qū)域。房間保持負壓，目的是防止核酸溢出。在這個地區(qū)，人們必須一直穿工作服。??

? ? ? ? ?手套和離開房間前脫離，防止擴張子污染其他地方。所有用于擴張和產(chǎn)品檢測的設(shè)備都應(yīng)指定用于該房間。PCR分析]二作也設(shè)置在該區(qū)域，例如酶切割、序列、克隆等，但實驗室必須盡量將這些活動分隔到不同的區(qū)域和不同的房間。降低擴大產(chǎn)品的污染風(fēng)險。如果沒有條件在該區(qū)域設(shè)置負壓，該區(qū)域必須設(shè)置排風(fēng)裝置。??

? ? ? ? ?第三：核酸提取區(qū)。??

? ? ? ? ?核酸提取區(qū)是進行樣品核酸提取的區(qū)域。該區(qū)域為負壓，目的是防止核酸溢出造成污染。樣品準(zhǔn)備區(qū)域包括從樣品中提取核酸和純化的區(qū)域和將核酸添加到包括PCR主反應(yīng)混合液管的操作區(qū)域。添加樣品后，PCR管蓋應(yīng)盡快蓋上。使用PCR板和蓋板時，陽性對照和含有目標(biāo)序列的樣品應(yīng)與待測樣分開操作，以免模板添加時造成交叉污染。?

? ? ? ? ?第四：試劑準(zhǔn)備區(qū)。??

? ? ? ? ?用于備考試劑。該區(qū)域為正壓，目的是防止污染物溢出。該區(qū)域內(nèi)部分為普通提取試劑的準(zhǔn)備區(qū)域、PCR試劑的準(zhǔn)備區(qū)域和PCR主反應(yīng)液的準(zhǔn)備區(qū)域。在普通提取試劑的準(zhǔn)備區(qū)域內(nèi)準(zhǔn)備樣品核酸提取時所需的分解液、提取液等PCR試劑準(zhǔn)備區(qū)域用于PCR試劑的制備和保存。例如準(zhǔn)備引物、探針等PCR試劑。為了防止交叉污染，避免反復(fù)冷凍和解凍，試劑貯藏溶液應(yīng)平均為小作業(yè)體積，貯藏在該房間后，PCR主反應(yīng)液準(zhǔn)備區(qū)進行主反應(yīng)混合液(樣品除外)。將所有PCR所需試劑混合)添加到PCR管的操作中。重要提示:不得將其他房間的材料(包括擴張、模板和目標(biāo)核酸或陽性對照、供應(yīng)品或設(shè)備)帶入試劑準(zhǔn)備區(qū)。??